EGFR抑制劑的制作方法

egfr抑制劑
1.本發明提供一種化合物，該化合物是含有t790m/l858r、t790m/l858r/c797s、l858r、l858r/c797s的egfr突變體的選擇性變構抑制劑，還提供該化合物的制造、含有該化合物的藥物組合物以及該化合物作為治療活性物質的用途。
2.本發明提供了式(i)的新型化合物，
[0003][0004]
其中
[0005]
r1選自
[0006]
i)氟和
[0007]
ii)氯；
[0008]
r2選自
[0009]
i)h和
[0010]
ii)氟；
[0011]
r3為c
1-6-烷基；
[0012]
r4為c
1-6-烷基；
[0013]
或者r3和r4與它們所連接的氮原子一起形成任選地被r5取代的雜環烷基；并且
[0014]
r5選自
[0015]
i)羥基和
[0016]
ii)羥基-c
1-6-烷基；
[0017]
或其藥用鹽。
[0018]
her家族受體酪氨酸激酶是細胞生長、分化和存活的介質。受體家族包括四個不同的成員，即表皮生長因子受體(egfr，erbbl，或her1)、her2(erbb2)、her3(erbb3)和her4(erbb4)。在配體結合后，受體形成同二聚體和異二聚體并且固有酪氨酸激酶活性的隨后激
活導致受體自身磷酸化和下游信號傳導分子的激活(yarden,y.,sliwkowski,mx.untangling the erbb signalling network.nature review mol cell biol.2001年2月；2(2):127-37)。egfr通過過表達或突變去調節已經牽涉許多類型的人類癌癥，包括結直腸癌、胰腺癌、神經膠質瘤、頭頸癌和肺癌，尤其是非小細胞肺癌(nsclc)，并且多年來已經開發了若干egfr靶向劑(ciardiello,f.和tortora,g.(2008).egfr antagonists in cancer treatment.the new england journal of medicine 358,1160-1174)。厄洛替尼(erlotinib)()，一種可逆性egfr酪氨酸激酶抑制劑，在許多國家被批準用于復發性nsclc的治療。
[0019]
在腫瘤攜帶體細胞激酶結構域突變的nsclc患者亞組中觀察到egfr酪氨酸激酶抑制劑令人印象深刻的單一藥劑活性，而在野生型egfr患者中的臨床益處大大減小(paez,j.等人(2004).egfr mutations in lung cancer:correlation with clinical response to gefitinib therapy.science(new york,ny 304,1497-1500)。egfr最常見的體細胞突變是外顯子19缺失，其中δ746-750是最普遍的突變，以及外顯子21氨基酸取代，其中l858r是最常見的突變(sharma sv,bell dw,settleman j,haber da.epidermal growth factor receptor mutations in lung cancer.nat rev cancer.2007 mar；7(3):169-81)。
[0020]
常常由于受體atp位點內的二次t790m突變而頻繁出現治療抗性。開發的一些突變體選擇性不可逆抑制劑針對t790m突變體具有高活性，但其功效可因c797s的獲得性突變而受損，該突變是與它們形成關鍵共價鍵的半胱氨酸殘基(thress,k.s.等人，acquired egfr c797s mutation mediates resistance to azd9291 in non-small cell lung cancer harboring egfr t790m.nat.med.21,560
–
562(2015))。wang進一步報道c797s突變是對靶向t790m的egfr抑制劑的抗性的主要機制(wang等人，egfr c797s mutation mediates resistance to third-generation inhibitors in t790m-positive non-small cell lung cancer,j hematol oncol.2016；9:59)。yang描述了引起對奧西替尼的耐藥性的其他突變，例如，l718q(yang et al,investigating novel resistance mechanisms to third-generation egfr tyrosine kinase inhibitor osimertinib in non
–
small cell lung cancer patients,clinical cancer research,doi:10.1158/1078-0432.ccr-17-2310).lu等人.(targeting egfr
l858r/t790m
and egfr
l858r/t790m/c797s resistance mutations in nsclc:current developments in medicinal chemistry,med res rev 2018；1-32)關于nsclc治療中靶向egfr
l858r/t790m
和egfr
l858r/t790m/c797s
抗性突變的綜述文章中的報告。
[0021]
由于大多數可用的egfr酪氨酸激酶抑制劑靶向激酶的atp位點，因此需要例如通過靶向抗藥性egfr突變體而起不同作用的新治療劑。
[0022]
近期研究表明，有目的地靶向變構位點可導致突變體選擇性抑制劑(jia等人overcoming egfr(t790m)and egfr(c797s)resistance with mutant-selective allosteric inhibitors,june 2016,nature 534,129-132)。
[0023]
僅需要產生可用于癌癥的治療性和/或預防性治療，特異性抑制含有t790m/l858r、t790m/l858r/c797s、l858r、l858r/c797s的egfr突變體，尤其是含有t790m和c797s的egfr突變體的選擇性分子。
[0024]
如本文所述的式(i)化合物對含有t790m/l858r、t790m/l858r/c797s、l858r、l858r/c797s的egfr突變體，特別是含有t790m和c797s的egfr突變體確實具有改善的egfr
效力和選擇性，以及改善的物理化學性質。
[0025]
術語“c
1-6-烷基”表示具有1個至6個碳原子、特別是1個至3個碳原子的單價直鏈或支鏈飽和烴基。c
1-6-烷基的示例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基和戊基。特別地，c
1-6
烷基基團為甲基、乙基和異丙基。更特別的示例為甲基。
[0026]
術語“雜環烷基”表示4至9個環原子的單價飽和或部分不飽和的單環或雙環體系，其包含1、2或3個選自n、o和s的雜原子，剩余的環原子是碳。雙環意指由兩個具有一個或兩個共同環原子的環組成。單環飽和雜環烷基的示例為4,5-二氫-噁唑基、氧雜環丁烷基、氮雜環丁烷基、吡咯烷基、2-氧代-吡咯烷-3-基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、吡唑烷基、咪唑烷基、噁唑啉基、異噁唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、四氫吡喃基、四氫噻喃基、哌嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基、1,1-二氧代-硫代嗎啉-4-基、氮雜環庚烷基、二氮雜環庚烷基、高哌嗪基或氧氮雜環庚烷基。雙環飽和雜環烷基的示例為氧雜雙環[2.2.1]庚烷基、氧雜螺[3.3]庚烷基、8-氮雜-雙環[3.2.1]辛烷基、奎寧環基、8-氧雜-3-氮雜-雙環[3.2.1]辛烷基、9-氮雜-雙環[3.3.1]壬烷基、3-氧雜-9-氮雜-雙環[3.3.1]壬烷基或3-噻-9-氮雜-雙環[3.3.1]壬烷基。部分不飽和雜環烷基的示例為二氫呋喃基、咪唑啉基、二氫噁唑基、四氫吡啶基或二氫吡喃基。特別的雜環烷基為哌啶基、吡咯烷基和氮雜環庚烷基。
[0027]
術語“羥基”表示-oh基團。
[0028]
術語“羥基-c
1-6-烷基烷基”表示一種c
1-6-烷基烷基基團，其中該c
1-6-烷基烷基基團的至少一個氫原子被羥基基團替換。羥基-c
1-6-烷基的示例包括羥基甲基、羥基乙基和羥基丙基。特別的示例為羥基甲基。
[0029]
術語“藥用鹽”是指保留游離堿或游離酸的生物效果和特性的式(i)化合物的那些鹽，這些鹽在生物學或其他方面不是不合需要的。這些鹽用無機酸諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等(特別是鹽酸)和有機酸諸如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、馬來酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲基磺酸、乙基磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸、n-乙?；腚装彼岬刃纬?。此外，這些鹽可通過將無機堿或有機堿加入游離酸中來制備。衍生自無機堿的鹽包括但不限于鈉、鉀、鋰、銨、鈣、鎂鹽等。衍生自有機堿的鹽包括但不限于以下各項的鹽：伯胺、仲胺和叔胺、取代胺(包括天然存在的取代胺)、環胺和堿性離子交換樹脂(諸如異丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、賴氨酸、精氨酸、n-乙基哌啶、哌啶、聚亞胺樹脂等)。特別的式(i)化合物的藥用鹽為鹽酸鹽、甲磺酸鹽和檸檬酸鹽。
[0030]
縮寫"um"意指“微摩爾”，與符號"μm"等同。
[0031]
縮寫"ul"意指“微升”，與符號"μl"等同。
[0032]
縮寫"ug"意指“微克”，與符號"μg"等同。
[0033]
式(i)化合物可以含有若干不對稱中心，并且可以以光學純對映體、對映體的混合物(例如外消旋體)、光學純非對映體、非對映體的混合物、非對映外消旋體或非對映外消旋體的混合物存在。
[0034]
根據cahn-ingold-prelog慣例，非對稱碳原子可以是“r”或“s”構型。
[0035]
此外，本發明的一個實施例是如本文所述的式(i)化合物及其藥用鹽，特別地是如本文所述的根據式(i)的化合物。
[0036]
此外，本發明的一個實施例是如本文所述的根據式(i)的化合物。
[0037]
本發明的一個特定實施例提供如本文所述的根據式(i)的化合物，其中
[0038]
r1選自
[0039]
i)氟和
[0040]
ii)氯；
[0041]
r2選自
[0042]
i)h和
[0043]
ii)氟；
[0044]
r3和r4為甲基；
[0045]
或者r3和r4與它們所連接的氮原子一起形成任選地被r5取代的雜環烷基，其中所述雜環烷基選自
[0046]
i)哌啶基，
[0047]
ii)吡咯烷基和
[0048]
iii)氮雜環庚烷基；
[0049]
r5選自
[0050]
i)羥基和
[0051]
ii)羥基甲基；
[0052]
或其藥用鹽。
[0053]
本發明的另一個特定實施例提供如本文所述的根據式(i)的化合物，其中
[0054]
r1為氟；
[0055]
r2選自
[0056]
i)h和
[0057]
ii)氟；
[0058]
r3和r4與它們所連接的氮原子一起形成任選地被r5取代的雜環烷基，其中所述雜環烷基選自
[0059]
i)哌啶基，
[0060]
ii)吡咯烷基和
[0061]
iii)氮雜環庚烷基；
[0062]
r5選自
[0063]
i)羥基和
[0064]
ii)羥基甲基；
[0065]
或其藥用鹽。
[0066]
本發明的一個特定實施例提供如本文所述的根據式(i)的化合物，其中r1為氟。
[0067]
本發明的一個特定實施例提供如本文所述的根據式(i)的化合物，其中r1為氟。
[0068]
本發明的一個特定實施例提供如本文所述的根據式(i)的化合物，其中r2為h。
[0069]
本發明的一個特定實施例提供如本文所述的根據式(i)的化合物，其中
[0070]
r3和r4與它們所連接的氮原子一起形成任選地被r5取代的雜環烷基，其中所述雜環烷基選自
[0071]
i)哌啶基，
[0072]
ii)吡咯烷基和
[0073]
iii)氮雜環庚烷基。
[0074]
本發明的一個特定實施例提供如本文所述的根據式(i)的化合物，其中該化合物選自
[0075]
(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[4-氯-6-[4-[3-[[4-(羥基甲基)-1-哌啶基]甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-n-噻唑-2-基-乙酰胺；
[0076]
(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[4-氟-6-[4-[3-[[4-(羥基甲基)-1-哌啶基]甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-n-噻唑-2-基-乙酰胺；
[0077]
(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[6-[4-[3-[(二甲基氨基)甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-4-氟-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-n-噻唑-2-基-乙酰胺；
[0078]
(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[4-氟-6-[4-[3-[(4-羥基-1-哌啶基)甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-n-噻唑-2-基-乙酰胺；
[0079]
(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[4-氟-1-氧代-6-[4-[3-(吡咯烷-1-基甲基)-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]異吲哚啉-2-基]-n-噻唑-2-基-乙酰胺；
[0080]
(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[4-氟-6-[4-[3-[[(4rs)-4-羥基氮雜環庚烷-1-基]甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-n-噻唑-2-基-乙酰胺；和
[0081]
(2rs)-2-[4,7-二氟-6-[4-[3-[[4-(羥基甲基)-1-哌啶基]甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-n-噻唑-2-基-乙酰胺；
[0082]
或其藥用鹽。
[0083]
因此，本發明還涉及制備根據本發明的化合物的方法，所述方法包括式(b1)化合物的偶聯
[0084]
因此，本發明還涉及制備根據本發明的化合物的方法，所述方法包括式(b1)化合物或其藥用鹽
[0085][0086]
與式(b2)化合物
[0087][0088]
在堿和偶聯劑存在下反應。
[0089]
該反應可以方便地在溶劑中進行。該溶劑可以為例如dmf。
[0090]
在該反應中，該堿可以為例如hunig堿、三甲胺、三乙胺、二甲胺或二乙胺。方便地，該堿可以為hunig堿。
[0091]
在反應中，偶聯劑可以是例如hatu。
[0092]
適宜的反應條件可以在約5℃至約60℃之間，特別是在約10℃至約50℃之間，更特別是在約15℃至約40℃之間。
[0093]
優選的反應條件是使用在dmf中的hunig堿和hatu在約25℃持續約1小時至約48小時之間，特別是約1小時至約16小時之間。
[0094]
如本文所述的式(i)化合物的制造工藝也是本發明的目的。
[0095]
本發明的式(i)化合物的制備可按照順序或并發合成路線進行。本發明的合成如以下總體方案所示。進行所得產物的反應和純化所需的技能是本領域技術人員已知的。除非有相反說明，否則在以下對過程的描述中使用的取代基和標記具有本文之前給出的意義。
[0096]
更詳細地，式(i)化合物可以通過下面給出的方法、通過實例中給出的方法或通過類似方法來制備。各個反應步驟的適當反應條件是本領域技術人員已知的。反應順序不限于方案1中顯示的順序，但是，取決于起始物質及其各自的反應性，可自由改變反應步驟的順序。起始物質可商購獲得，或者可以通過類似于下面給出的方法的方法、通過在說明書中或在實施例中引用的參考文獻中描述的方法或通過本領域已知的方法制備。
[0097]
方案1
[0098][0099]
通式(i)的化合物可通過下述制備獲得，例如，可通過先前制備的氨基酯1與經適宜取代的式2所示的溴甲基苯甲酸酯進行環合反應以得到所希望的異吲哚啉酯3。3與式4的適當取代的硼酸酯的suzuki偶聯產生所希望的式5化合物。酯5的皂化和與2-氨基噻唑6與偶聯劑(例如hatu)的酰胺偶聯產生所希望的異吲哚啉
[0100]
一般來說，在某些情況下，用于合成式(i)化合物的步驟順序以及進一步的官能化也可改變。
[0101]
在實例中沒有描述其制備的范圍內，式(i)化合物以及全部中間體產物可以根據類似方法或根據本文所述方法制備。原料是可商購的，是本領域已知的或者可以通過本領域已知的方法或與其類似的方法制備。
[0102]
應當理解，本發明中的通式(i)的化合物可在官能團處衍生化以提供能夠在體內轉化回母體化合物的衍生物。
[0103]
本發明的某一實施例涉及如本文所述的式(i)化合物或其藥用鹽，其用作治療活性物質。
[0104]
本發明的某一實施例涉及如本文所述的式(i)化合物或其藥用鹽，其用于癌癥特別是非小細胞肺癌的治療性和/或預防性治療。
[0105]
本發明的某一實施例涉及如本文所述的式(i)化合物或其藥用鹽，其用于非小細胞肺癌的治療性和/或預防性治療。
[0106]
本發明的某一實施例涉及如本文所述的式(i)化合物或其藥用鹽，其用于制造用于癌癥特別是非小細胞肺癌的治療性和/或預防性治療的藥物。
[0107]
本發明的某一實施例涉及一種藥物組合物，其包含如本文所述的式(i)化合物或其藥用鹽和藥用佐劑物質。
[0108]
本發明的某一實施例涉及用于通過向有此需要的患者施用如本文所述的式(i)化合物或其藥用鹽來治療性和/或預防性治療癌癥、特別是非小細胞肺癌的方法。
[0109]
本發明的某一實施例涉及如本文所述的式(i)化合物或其藥用鹽，其作為藥物用于苦于癌癥特別是非小細胞肺癌的具有egfr激活突變的患者的治療性和/或預防性治療
中，包括確定所述患者的egfr激活突變狀態，然后將如本文所述的式(i)化合物或其藥用鹽施用至所述患者。
[0110]
本發明的某一實施例涉及如本文所述的式(i)化合物或其藥用鹽，其作為藥物用于苦于癌癥特別是非小細胞肺癌的具有egfr突變t790m/l858r、t790m/l858r/c797s、l858r和/或l858r/c797s的患者的治療性和/預防性治療中，包括確定所述患者的egfr激活突變狀態，然后將如本文所述的式(i)化合物或其藥用鹽施用至所述患者。
[0111]
本發明的某一實施例涉及如本文所述的式(i)化合物或其藥用鹽，其作為藥物用于苦于癌癥特別是非小細胞肺癌的具有使用egfr突變試驗v2確定的egfr激活突變的患者的治療性和/或預防性治療中，包括確定所述患者的egfr激活突變狀態，然后將如本文所述的式(i)化合物或其藥用鹽施用至所述患者。
[0112]
本發明還特別涉及：
[0113]
用作治療活性物質的式(i)化合物；
[0114]
包含式(i)化合物以及治療惰性載體的藥物組合物；
[0115]
用于治療或預防癌癥的式(i)化合物；
[0116]
用于治療或預防非小細胞肺癌的式(i)化合物；
[0117]
式(i)化合物用于治療或預防癌癥的用途；
[0118]
式(i)化合物用于治療或預防癌癥用于治療或預防非小細胞肺癌的用途；
[0119]
式(i)化合物用于制備治療或預防癌癥的藥物的用途；
[0120]
式(i)化合物用于制備治療或預防非小細胞肺癌的藥物的用途；
[0121]
一種用于治療或預防癌癥的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用有效量的式(i)化合物；以及
[0122]
一種用于治療或預防非小細胞肺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用有效量的式(i)化合物。
[0123]
此外，本發明包括式(i)化合物的以其相應氘代形式下的全部取代基(只要適用)。
[0124]
此外，本發明包括式(i)化合物的全部光學異構體(只要適用)，即，非對映異構體、非對映異構混合物、外消旋混合物、它們的全部相應對映異構體和/或互變異構體以及其溶劑化物。
[0125]
式(i)化合物可能含有一個或多個不對稱中心，并可因此作為外消旋體、外消旋混合物、單一對映異構體、非對映異構混合物和個體非對映異構體出現。根據分子上各種取代基的性質，可以存在另外的不對稱中心。每個此類不對稱中心將獨立地產生兩種光學異構體，并且意圖是呈混合物形式和作為純化合物或部分純化的化合物的所有可能的光學異構體和非對映異構體都包括在本發明內。本發明意在涵蓋這些化合物的所有此類異構形式。這些非對映異構體的獨立合成或它們的色譜分離可以如本領域已知的那樣通過對本文公開的方法的適當修改來實現。它們的絕對立體化學可以通過結晶產物或結晶中間體的x-射線晶體學測定，如果需要，所述結晶產物或結晶中間體用含有已知絕對構型的不對稱中心的試劑衍生化。若需要，可將化合物的外消旋混合物分離，使得個體對映異構體被分離出來。分離可以通過本領域熟知的方法進行，諸如將化合物的外消旋混合物偶聯至對映異構體純的化合物以形成非對映異構體混合物，接著通過標準方法諸如分級結晶或色譜法分離單獨的非對映異構體。
[0126]
在提供光學純對映異構體的實施例中，光學純對映異構體意指化合物含有》處90重量％的所需異構體，特別是》95重量％的所需異構體，或更特別是》99重量％的所需異構體，所述重量百分比基于化合物的異構體的總重量計?？赏ㄟ^手性選擇性合成或通過對映異構體分離來制備手性純化合物或手性富集化合物?？梢詫K產物，或者可替代地對合適的中間體進行對映異構體的分離。
[0127]
此外，本發明的一個實施例為如本文所述的式(i)化合物，其根據本文所述的方法中的任一者進行制造。
[0128]
測定程序
[0129]
式(i)化合物及其藥用鹽具備有價值的藥學性質。根據后文給出的試驗研究該化合物。
[0130]
htrf磷酸egfr tmlrcs測定(細胞)
[0131]
細胞系和培養基
[0132]
baf3-tmlrcs細胞系獲自crownbio(san diego,ca,usa)。將細胞在37℃、5％co2下維持在補充有10％胎牛血清(fbs)(gibco)的rpmi atcc(gibco 31870)+2mm谷氨酰胺+0.5μg/ml嘌呤霉素中。
[0133]
方案：
[0134]
在將板用12.5nl待測試化合物的dmso溶液(在劑量反應中)或僅用dmso預填充后，以12.5μl生長培養基/孔，按20000個細胞/孔，如上將細胞轉移至greiner bio-one，nr.784-08微量滴定板。將板以300x g旋轉30秒后，將細胞在37℃、5％co2、95％濕度下孵育4小時。通過向化合物混合物中添加4 μl/孔補充的裂解緩沖液(cis-bio，磷酸-egfr htrf試劑盒，64eg1peh)，接著在室溫下振蕩(400rpm)孵育30分鐘，使細胞裂解。然后將板冷凍并在-80℃儲存過夜。第二天，將板解凍后，向每個孔中添加4μl在提供的檢測緩沖液中制備的抗-磷酸-egfr穴狀化合物和抗-磷酸-egfr-d2抗體溶液的混合物。然后將有蓋子的板在室溫下孵育4小時，之后使用envision讀數器(perkin elmer)讀取616nm和665nm的熒光發射。使用665:616標準化信號比率乘以10000，以與上述類似的方式分析數據。
[0135]
結果如表1所示。
[0136]
表1：baf3細胞htrf phospho egfr tmlrcs測定數據
[0137]
[0138][0139]
式(i)化合物及其藥用鹽可以用作藥物(例如，以藥物制劑的形式)。藥物制劑可內部給藥，諸如經口(例如，以片劑、包衣片劑、糖衣丸、硬和軟明膠膠囊、溶液、乳劑或混懸劑的形式)、經鼻(例如，以鼻噴霧劑的形式)、經直腸(例如，以栓劑的形式)或經眼部局部(例如，以溶液、軟膏、凝膠劑或水溶性聚合物插入物的形式)給藥。但是，也可通過腸胃外諸如肌內、靜脈內或眼內(例如，以無菌注射液的形式)給藥。
[0140]
式(i)化合物及其藥用鹽可與藥學上惰性的無機或有機助劑一起加工以生產片劑、包衣片劑、糖衣丸、硬明膠膠囊、注射液或外用制劑。例如，可使用乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石粉、硬脂酸或其鹽等本身作為片劑、糖衣丸和硬明膠膠囊的助劑。
[0141]
用于軟明膠膠囊的合適的助劑為例如植物油、蠟、脂肪、半固體物質和液體多元醇等。
[0142]
用于制備溶液和糖漿的合適的助劑為例如水、多元醇、蔗糖、轉化糖、葡萄糖等。
[0143]
用于注射液的合適的助劑為例如水、醇、多元醇、甘油、植物油等。
[0144]
用于栓劑的合適的助劑為例如天然或硬化油、蠟、脂肪、半固體或液體多元醇等。
[0145]
用于局部眼用制劑的合適的助劑為例如環糊精、甘露醇或本領域已知的許多其他載體和賦形劑。
[0146]
此外，藥物制劑可以含有防腐劑、增溶劑、增粘物質、穩定劑、潤濕劑、乳化劑、甜味劑、著色劑、香料、用于改變滲透壓的鹽、緩沖劑掩模劑或抗氧化劑。它們還可以含有其他有治療價值的物質。
[0147]
劑量可以在寬范圍內變化，當然將適合每種特定情況下的各種要求。一般而言，口服給藥的日劑量為每kg體重約0.1mg至20mg、優選為每kg體重約0.5mg至4mg(例如每人約300mg)應當是合適的，其優選地分為1-3個單獨的劑量(可由例如相同的量組成)。在局部給藥的情況下，該制劑可包含按重量計0.001％至15％的藥物，并且所需劑量可介于0.1mg至25mg之間，其每天或每周給藥一次、或每天給藥多次(2至4次)或每周給藥多次。但是，顯而易見的是，當顯示為適用時，可超過本文中給出的上限或下限。
[0148]
藥物組合物
[0149]
式(i)化合物及藥用鹽可用作治療活性物質，例如，以藥物制劑的形式。藥物制劑可例如以片劑、包衣片劑、糖衣丸、硬和軟明膠膠囊、溶液、乳劑或混懸劑的形式口服施用。然而，施用也可例如以栓劑的形式通過直腸進行，或例如以注射溶液的形式通過胃腸外進行。
[0150]
式(i)化合物及其藥用鹽可與藥學上惰性的無機或有機載體一起加工，以用于生產藥物制劑。例如，乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石粉、硬脂酸或其鹽等可作為此類載體用于片劑、包衣片劑、糖衣丸和硬明膠膠囊。用于軟明膠膠囊的合適的載體為，例如，植物油、蠟、脂肪、半固體和液體多元醇等。然而，依據活性物質的特性，在軟明膠膠囊的情況中經常不需要載體。用于生產溶液和糖漿劑的合適的載體為，例如，水、多元醇、甘油、植物油等。用于栓劑的合適的載體為，例如，天然或硬化油、蠟、脂肪、半液體或液體多元醇等。
[0151]
此外，藥物制劑可包含藥用佐劑物質，諸如防腐劑、增溶劑、穩定劑、潤濕劑、乳化劑、甜味劑、著色劑、調味劑、用于改變滲透壓的鹽、緩沖劑、掩蔽劑或抗氧化劑。它們還可以含有其他有治療價值的物質。
[0152]
本發明也提供包含式(i)化合物或其藥用鹽以及治療惰性載體的藥物及其生產方法，該方法包括使一種或多種式(i)化合物和/或其藥用鹽以及(若需要)一種或多種其他治療上有價值的物質與一種或多種治療上惰性的載體一起形成蓋倫制劑施用形式。
[0153]
劑量可以在很寬的限值內變化，當然，必須根據每種特定情況下的個體需要進行調整。在口服施用的情況下，用于成年人的劑量可從每天約0.01mg至約1000mg的通式(i)化合物或相應量的其藥用鹽改變。日劑量可作為單一劑量施用或以多個分割劑量施用，此外，當發現有指示可超過上限時，也可超過上限。
[0154]
以下實例例證而不限制本發明，而僅作為本發明的代表。藥物制劑方便地含有約1-500mg，特別是1-100mg的式(i)化合物。根據本發明的組合物的示例包括：
[0155]
實例a
[0156]
以下組合物的片劑按常規方式進行生產：
[0157][0158]
表2：可能的片劑組成
[0159]
生產程序
[0160]
1.將成分1、2、3和4混合并用純凈水制粒。
[0161]
2.在50℃下干燥顆粒。
[0162]
3.讓顆粒通過合適的研磨設備。
[0163]
4.添加成分5并混合三分鐘；在合適的壓機上壓制。
[0164]
實例b-1
[0165]
生產以下組合物的膠囊：
[0166][0167]
表3：可能的膠囊成分組成
[0168]
生產程序
[0169]
1.將成分1、2和3在合適的混合器中混合30分鐘。
[0170]
2.添加成分4和5并混合3分鐘。
[0171]
3.填充到合適的膠囊中。
[0172]
首先在混合器中將式(i)化合物與乳糖和玉米淀粉混合，然后在粉碎機中混合。使混合物返回混合器；向其中加入滑石粉，并且混合充分。利用機器將混合物裝填到合適的膠囊中，例如硬明膠膠囊。
[0173]
實例b-2
[0174]
制造具有以下組成的軟明膠膠囊：
[0175]
成分mg/膠囊式(i)化合物5黃蠟8氫化大豆油8部分氫化的植物油34大豆油110總計165
[0176]
表4：可能的軟明膠膠囊成分組成
[0177][0178][0179]
表5：可能的軟明膠膠囊組成
[0180]
生產程序
[0181]
將式(i)化合物溶解在其他成分的溫熱熔體中，并將混合物填充到適宜尺寸的軟明膠膠囊中。根據一般程序處理填充的軟明膠膠囊。
[0182]
實例c
[0183]
制造具有以下組成的栓劑：
[0184]
成分mg/栓式(i)化合物15栓基質1285總計1300
[0185]
表6：可能的栓劑組成
[0186]
生產程序
[0187]
在玻璃或鋼容器中將栓基質熔融，混合充分并冷卻至45℃。此時，向其中添加式(i)化合物的細粉末并攪拌，直到該化合物完全分散為止。將混合物倒入合適尺寸的栓模具內，靜置冷卻；然后從模具中移除栓劑并獨立包裝在蠟紙或金屬箔中。
[0188]
實例d
[0189]
生產以下組合物的注射液：
[0190]
成分mg/注射溶液式(i)化合物3聚乙二醇400150
乙酸適量添加至ph為5.0注射溶液用水添加至1.0ml
[0191]
表7：可能的注射溶液組成
[0192]
生產程序
[0193]
將式(i)化合物溶解在聚乙二醇400和注射用水(部分)的混合物中。用乙酸將ph調節至5.0。通過加入剩余量的水將體積調節至1.0ml。過濾溶液，使用適當的過量投料(overage)將其填充到小瓶中并滅菌。
[0194]
實例e
[0195]
制造具有以下組成的袋劑：
[0196]
成分mg/袋式(i)化合物50乳糖，細粉末1015微晶纖維素(avicel ph 102)1400羧甲基纖維素鈉14聚乙烯基吡咯烷酮k 3010硬脂酸鎂10調味添加劑1總計2500
[0197]
表8：可能的袋劑組成
[0198]
生產程序
[0199]
將式(i)化合物與乳糖、微晶纖維素和羧甲基纖維素鈉混合，并與聚乙烯基吡咯烷酮在水中的混合物一起造粒。將顆粒與硬脂酸鎂和調味添加劑混合并填充到袋內。
[0200]
實例
[0201]
提供以下實例用于說明本發明。它們不應被認為是對本發明范圍的限制，而僅僅是作為其代表。
[0202]
實例1
[0203]
(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[4-氯-6-[4-[3-[[4-(羥基甲基)-1-哌啶基]甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-n-噻唑-2-基-乙酰胺
[0204]
[0205]
步驟1：2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-氧代-乙酸乙酯
[0206][0207]
將二氧化硒(22.85g，205.94mmol，2當量)加入2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯(20.0g，102.97mmol)溶解在200ml的1,4-二噁烷中的溶液中。將反應混合物在80℃下攪拌5小時。將反應混合物在真空下濃縮以給出殘余物。通過快速層析在硅膠柱上純化粗產物，用石油醚:乙酸乙酯2:1到乙酸乙酯:乙醇10:1的梯度洗脫，以獲得淺褐色油狀的所希望的2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-氧代-乙酸乙酯(定量產率)，ms：m/e＝209.1(m+h
+
)。
[0208]
步驟2：2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-羥基亞氨基-乙酸乙酯
[0209][0210]
在室溫下，將鹽酸羥胺(6.42g，92.45mmol，1.1當量)和醋酸鈉(13.79g，168.1mmol，2當量)加入2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-氧代-乙酸乙酯(實例1，步驟1)(17.5g，84.05mmol)溶解在145ml乙醇中的溶液中。將反應混合物在80℃下攪拌3.5小時。將反應混合物濃縮，以水萃取，并使用乙醇/thf/乙酸乙酯1:1:8的混合物萃取五次。將有機層濃縮至干。獲得黃色固體狀的所希望的2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-羥基亞氨基-乙酸乙酯(15g，80％產率)，ms:m/e＝224.1(m+h
+
)，并直接用于下一步驟。
[0211]
步驟3：(2rs)-2-氨基-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯
[0212][0213]
在室溫下，將pd/c(30.0g，67.2mmol，1當量，10％)加入2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-羥基亞氨基-乙酸乙酯(實例1，步驟2)(15.0g，67.2mmol)溶解在225ml乙醇和120ml thf中的溶液中。在45℃，用h2將混合物氫化24小時。過濾反應混合物，并在真空下濃縮濾液。獲得褐色油狀的所希望的(2rs)-2-氨基-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯(定量產率)，ms:m/e＝210.1(m+h
+
)，并直接用于下一步驟。
[0214]
步驟4：(2rs)-2-氨基-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯鹽酸鹽
[0215][0216]
在25℃下，將(2rs)-2-氨基-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯(實例1，步驟3)(15.0g,82.79mmol)在hcl/etoh(300ml，1200mmol，14.5當量，2.5mol/l)中的溶液攪拌36小時。在低于25℃下，將反應混合物在真空下濃縮以給出褐色油狀的殘余物。將150ml乙腈加入殘余物中，收集沉淀的黃色固體并在低于25℃下真空干燥以給出黃色固體狀的所希望的(2rs)-2-氨基-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯鹽酸鹽(定量產率)，ms：m/e＝210.1(m+h
+
)。
[0217]
步驟5：2-(溴甲基)-3-氯-5-碘-苯甲酸乙酯
[0218][0219]
將3-氯-5-碘-2-乙基-苯甲酸酯(57.3g，176mmol)溶解在400ml四氯乙烯中，并在室溫下添加n-溴琥珀酰亞胺(46.9g,265mmol,1.5當量)和aibn(13.4g，88.3mmol，0.5當量)。在80℃，將該混合物攪拌16小時。將反應混合物濃縮至干。通過快速層析在硅膠柱上純化粗產物，用石油醚:乙酸乙酯1:0至10:1的梯度洗脫，以獲得粉色固體狀的所希望的產物(56g，76％產率)。
[0220]
步驟6：(2rs)-2-(4-氯-6-碘-1-氧代-異吲哚啉-2-基)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯
[0221][0222]
將(2rs)-2-氨基-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯鹽酸鹽(實例1，步驟4)(12g，48.8mmol，1當量)溶解在120ml的二噁烷和20ml的dmf中。在室溫下，添加2-(溴甲基)-3-氯-5-碘-苯甲酸乙酯(實例1，步驟5)(19.7g,48.8mmol)和二異丙基乙胺(34ml，195mmol，4當量)。將混合物在室溫下攪拌30分鐘，再在60℃攪拌2小時。用水萃取反應混合物，并且用乙酸乙酯萃取兩次。有機層用鹽水萃取，以硫酸鈉干燥，并濃縮至干。通過快速層析在硅膠柱上純化粗產物，用乙酸乙酯:甲醇100:0至90:10的梯度洗脫，以獲得淺紅色固體狀的所希望的產物(14.5g，55％產率)，ms:m/e＝486.2(m+h
+
)。
[0223]
步驟7：[3-(4-溴苯基)-1-雙環[1.1.1]戊烷基]甲醇
[0224][0225]
將3-(4-溴苯基)雙環[1.1.1]戊烷-1-羧酸(cas 1980054-39-4)(500mg,1.77mmol)溶解在4ml thf中并將混合物冷卻至0℃-5℃。在0℃-5℃逐滴添加硼烷-甲硫配合物(thf中的2m)(1.0ml，2.04mmol，1.15當量)并在室溫將混合物攪拌16小時。逐滴添加10ml的甲醇并將混合物濃縮至干。用飽和碳酸鈉溶液萃取殘余物，并且用tbme萃取三次。將有機層用鹽水萃取，經硫酸鈉干燥，并濃縮至干以獲得作為白色固體狀的所希望的產物(478mg，定量產率)，ms：m/e＝236.9(m+h
+
)。
[0226]
步驟8：3-(4-溴苯基)雙環[1.1.1]戊烷-1-甲醛
[0227][0228]
將[3-(4-溴苯基)-1-雙環[1.1.1]戊烷基]甲醇(實例1，步驟7)(478mg,1.66mmol)溶解在11ml的二氯甲烷中并將混合物冷卻至0℃-5℃。在0℃-5℃添加戴斯-馬丁高碘劑(900mg，2.07mmol，1.25當量)并將混合物在室溫下攪拌2小時。添加40ml的二乙醚并過濾混合物。將濾液用1m氫氧化鈉溶液萃取并用二乙醚萃取三次。將有機層用5％硫代硫酸鈉水溶液和鹽水萃取，經硫酸鈉干燥，并濃縮至干以獲得作為白色固體狀的所希望的產物(430mg，定量產率)。
[0229]
步驟9：[1-[[3-(4-溴苯基)-1-雙環[1.1.1]戊烷基]甲基]-4-哌啶基]甲醇
[0230][0231]
將3-(4-溴苯基)雙環[1.1.1]戊烷-1-甲醛(實例1，步驟8)(430mg,1.63mmol)溶解在8ml的二氯甲烷中。在室溫下，添加哌啶-4-基甲醇(225mg，1.95mmol，1.2當量)和三乙酰氧基硼氫化鈉(517mg，2.44mmol，1.5當量)。在室溫，將混合物攪拌3小時。用飽和碳酸氫鈉溶液萃取反應混合物，再用二氯甲烷萃取三次。有機層用鹽水萃取，以硫酸鈉干燥，并濃縮至干。通過快速層析在硅膠柱上純化粗產物，用二氯甲烷:甲醇+1％氨100:0至90:10的梯度洗脫，以獲得白色固體狀的所希望的產物(495mg，70％產率)，ms:m/e＝352.0(m+h
+
)。
[0232]
步驟10：[1-[[3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)苯基]-1-雙
[[4-(羥基甲基)-1-哌啶基]甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-n-噻唑-2-基-乙酰胺
[0239][0240]
將(2rs)-2-[4-氯-6-[4-[3-[[4-(羥基甲基)-1-哌啶基]甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯(實例1，步驟11)(53mg,0.083mmol)溶解在2ml乙醇中。在室溫下，加入lioh(1m水溶液)(0.12ml，0.12mmol，1.5當量)。將混合物在室溫下攪拌16小時。將反應混合物在真空下濃縮至干，并將殘余物溶解在1ml dmf中。在室溫下，加入噻唑-2-胺(9mg，0.091mmol，1.1當量)、hunig堿(0.058ml，0.334mmol，4當量)和hatu(48mg，0.125mmol，1.5當量)。在室溫，將混合物攪拌16小時。用水萃取反應混合物，并且用乙酸乙酯萃取三次。有機層用水萃取，以硫酸鈉干燥，并濃縮至干。通過快速層析在胺改性硅膠柱上純化粗產物，用乙酸乙酯:甲醇100:0至80:20的梯度洗脫，以獲得作為棕色固體的所希望的產物(20mg，35％產率)，ms:m/e＝683.3(m+h
+
)。
[0241]
實例2
[0242]
(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[4-氟-6-[4-[3-[[4-(羥基甲基)-1-哌啶基]甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-n-噻唑-2-基-乙酰胺
[0243][0244]
步驟1：5-溴-2-(溴甲基)-3-氟-苯甲酸甲酯
[0245][0246]
將5-溴-3-氟-2-甲基苯甲酸甲酯(cas 2090424-20-5，5.91g，23.9mmol)溶解在100ml三氟甲基中，并在室溫下添加n-溴代琥珀酰亞胺(4.26g，23.9mmol，1當量)和aibn(393mg，2.39mmol，0.1當量)。在110℃，將該混合物攪拌3小時。冷卻反應混合物，用水萃取，并且用乙酸乙酯萃取兩次。用無水硫酸鈉干燥有機層，并濃縮至干。通過快速層析在硅膠柱上純化粗產物，用乙酸乙酯:庚烷0:100至50:50的梯度洗脫，以獲得作為淺黃色液體狀的所希望的5-溴-2-(溴甲基)-3-氟-苯甲酸甲酯(7.29g，94％產率)，ms：m/e＝326.8(m+h
+
)。
[0247]
步驟2：(2rs)-2-(6-溴-4-氟-1-氧代-異吲哚啉-2-基)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯
[0248][0249]
將(2rs)-2-氨基-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯鹽酸鹽(實例1，步驟4)(4.15g，16.9mmol，1當量)溶解在35ml的dmf中。在室溫下，添加5-溴-2-(溴甲基)-3-氟-苯甲酸甲酯(實例2，步驟1)(5.0g,15.3mmol)和三乙胺(10.7ml，76.7mmol，5當量)。在80℃，將該混合物攪拌16小時。用水萃取反應混合物，并且用乙酸乙酯萃取兩次。有機層用鹽水萃取，以硫酸鈉干燥，并濃縮至干。通過快速層析在硅膠柱上純化粗產物，用二氯甲烷:甲醇100:0到90:10的梯度洗脫，以獲得作為黃色固體狀的所希望的(2rs)-2-(6-溴-4-氟-1-氧代-異吲哚啉-2-基)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯(2.6g，40％產率)，ms：m/e＝422.1/424.1(m+h
+
)。
[0250]
步驟3：[2-[(1rs)-1-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-乙氧基-2-氧代-乙基]-7-氟-3-氧代-異吲哚啉-5-基]硼酸
[0251][0252]
標題化合物作為白色固體獲得，使用與實例1步驟10所述類似的化學法，從(2rs)-2-(6-溴-4-氟-1-氧代-異吲哚啉-2-基)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯(實例2，步驟2)起始。
[0253]
步驟4：(2rs)-2-[4-氟-6-[4-[3-[[4-(羥基甲基)-1-哌啶基]甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯
[0254][0255]
標題化合物作為棕色固體獲得，ms:m/e＝613.5(m+h
+
)，使用與實例1步驟11所述類似的化學法，從[2-[(1rs)-1-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-乙氧基-2-氧代-乙基]-7-氟-3-氧代-異吲哚啉-5-基]硼酸(實例2，步驟3)和[1-[[3-(4-溴苯基)-1-雙環[1.1.1]戊烷基]甲基]-4-哌啶基]甲醇(實例1，步驟9)起始。
[0256]
步驟5：(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[4-氟-6-[4-[3-[[4-(羥基甲基)-1-哌啶基]甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-n-噻唑-2-基-乙酰胺
[0257][0258]
標題化合物作為淺棕色固體獲得，ms：m/e＝667.4(m+h
+
)，使用與實例1步驟12所述類似的化學法，從(2rs)-2-[4-氟-6-[4-[3-[[4-(羥基甲基)-1-哌啶基]甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯(實例2，步驟4)和噻唑-2-胺起始。
[0259]
實例3
[0260]
(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[6-[4-[3-[(二甲基氨基)甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-4-氟-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-n-噻唑-2-基-乙酰胺
[0261][0262]
步驟1：1-(4-溴苯基)-3-(二乙氧基甲基)雙環[1.1.1]戊烷
[0263][0264]
將3-(4-溴苯基)雙環[1.1.1]戊烷-1-甲醛(實例1，步驟8)(168mg,0.67mmol)溶解在7ml甲苯中。在室溫下，添加原甲酸三乙酯(0.12ml，0.74mmol，1.1當量)和對甲苯磺酸一水合物(3mg，0.02mmol，0.03當量)。在室溫下，將混合物攪拌30分鐘。用飽和碳酸氫鈉溶液萃取反應混合物，再用二氯甲烷萃取三次。將有機層用鹽水萃取，經無水硫酸鈉干燥，并濃縮至干以獲得作為淺黃色油狀的所希望的產物(204mg，73％產率)。
[0265]
步驟2：(2rs)-2-[6-[4-[3-(二乙氧基甲基)-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-4-氟-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯
[0266]
[0267]
標題化合物作為棕色固體獲得，ms：m/e＝588.4(m+h
+
)，使用與實例1步驟11所述類似的化學法，從[2-[(1rs)-1-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-乙氧基-2-氧代-乙基]-7-氟-3-氧代-異吲哚啉-5-基]硼酸(實例2，步驟3)和1-(4-溴苯基)-3-(二乙氧基甲基)雙環[1.1.1]戊烷(實例3，步驟1)起始。
[0268]
步驟3：(2rs)-2-[6-[4-[3-(二乙氧基甲基)-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-4-氟-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-n-噻唑-2-基-乙酰胺
[0269][0270]
標題化合物作為淺棕色固體獲得，ms：m/e＝642.4(m+h
+
)，使用與實例1步驟12所述類似的化學法，從(2rs)-2-[6-[4-[3-(二乙氧基甲基)-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-4-氟-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯(實例3，步驟2)和噻唑-2-胺起始。
[0271]
步驟4：(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[4-氟-6-[4-(3-甲?；?1-雙環[1.1.1]戊烷基)苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-n-噻唑-2-基-乙酰胺
[0272][0273]
將(2rs)-2-[6-[4-[3-(二乙氧基甲基)-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-4-氟-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-n-噻唑-2-基-乙酰胺(實例3，步驟3)(85mg,0.13mmol)溶解在5ml丙酮中并在室溫下添加hcl(在水中37％)(0.013ml，0.013mmol，0.1當量)。將反應混合物在室溫攪拌16小時。用乙酸乙酯和飽和nahco3溶液萃取反應混合物。用乙酸乙酯反萃取水層。將有機層用水和鹽水洗滌。合并有機
層，經硫酸鈉干燥，過濾并濃縮至干以獲得作為淺棕色固體狀的所希望的產物(定量產率)，ms：m/e＝568.2(m+h
+
)。
[0274]
步驟5：(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[6-[4-[3-[(二甲基氨基)甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-4-氟-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-n-噻唑-2-基-乙酰胺
[0275][0276]
標題化合物作為白色固體獲得，ms：m/e＝597.5(m+h
+
)，使用與實例1步驟9所述類似的化學法，從(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[4-氟-6-[4-(3-甲?；?1-雙環[1.1.1]戊烷基)苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-n-噻唑-2-基-乙酰胺(實例3，步驟4)和二甲胺起始。
[0277]
實例4
[0278]
(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[4-氟-6-[4-[3-[(4-羥基-1-哌啶基)甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-n-噻唑-2-基-乙酰胺
[0279][0280]
步驟1：(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[4-氟-6-[4-(3-甲?；?1-雙環[1.1.1]戊烷基)苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]乙酸乙酯
[0281][0282]
標題化合物作為橙色油狀獲得，ms：m/e＝514.3(m+h+)，使用與實例1步驟11所述類似的化學法，從[2-[(1rs)-1-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-乙氧基-2-氧代-乙基]-7-氟-3-氧代-異吲哚啉-5-基]硼酸(實例2，步驟3)和3-(4-溴苯基)雙環[1.1.1]戊烷-1-甲醛(實例1，步驟3)起始。
[0283]
步驟2：(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[4-氟-6-[4-[3-[(4-羥基-1-哌啶基)甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]乙酸乙酯
[0284][0285]
標題化合物作為黃色蠟狀固體獲得，ms：m/e＝599.4(m+h
+
)，使用與實例1步驟9所述類似的化學法，從(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[4-氟-6-[4-(3-甲?；?1-雙環[1.1.1]戊烷基)苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]乙酸乙酯(實例4，步驟1)和哌啶-4-醇起始。
[0286]
步驟3：(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[4-氟-6-[4-[3-[(4-羥基-1-哌啶基)甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-n-噻唑-2-基-乙酰胺
[0287][0288]
標題化合物作為淺棕色固體獲得，ms：m/e＝635.5(m+h
+
)，使用與實例1步驟12所述類似的化學法，從(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[4-氟-6-[4-[3-[(4-羥基-1-哌啶基)甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]乙酸乙酯(實例4，步驟2)和噻唑-2-胺起始。
[0289]
實例5
[0290]
(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[4-氟-1-氧代-6-[4-[3-(吡咯烷-1-基甲基)-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]異吲哚啉-2-基]-n-噻唑-2-基-乙酰胺
[0291][0292]
標題化合物作為白色固體獲得，ms：m/e＝623.5(m+h
+
)，使用與實例1步驟9所述類似的化學法，從(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[4-氟-6-[4-(3-甲?；?1-雙環[1.1.1]戊烷基)苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-n-噻唑-2-基-乙酰胺(實例3，步驟4)和吡咯烷起始。
[0293]
實例6
[0294]
(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[4-氟-6-[4-[3-[[(4rs)-4-羥基氮雜環庚烷-1-基]甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-n-噻唑-2-基-乙酰胺
[0295][0296]
標題化合物作為白色固體獲得，ms：m/e＝667.5(m+h
+
)，使用與實例1步驟9所述類似的化學法，從(2rs)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-2-[4-氟-6-[4-(3-甲?；?1-雙環[1.1.1]戊烷基)苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-n-噻唑-2-基-乙酰胺(實例3，步驟4)和氮雜環庚烷-4-醇起始。
[0297]
實例7
[0298]
(2rs)-2-[4,7-二氟-6-[4-[3-[[4-(羥基甲基)-1-哌啶基]甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-n-噻唑-2-基-乙酰胺
[0299][0300]
步驟1：2-氟-3-碘-6-甲基-5-硝基苯甲酸
[0301][0302]
將6-氟-2-甲基-3-硝基苯甲酸(1.28g，6.43mmol)溶解在5ml硫酸中。在室溫下添加n-碘琥珀酰亞胺(1.59g，7.07mmol，1.1當量)。在室溫，將混合物攪拌16小時。將反應混合物倒在水上，并濾出所得沉淀。干燥固體，以獲得淺黃色固體狀的所希望的產物(2.15g，定量產率)，ms:m/e＝324.1(m-h
+
)。
[0303]
步驟2：2-氟-3-碘-6-甲基-5-硝基苯甲酸甲酯
[0304][0305]
將2-氟-3-碘-6-甲基-5-硝基苯甲酸(實例7，步驟1)(2.15g，6.61mmol)溶解在10ml的dmf中。在室溫下，加入碳酸鉀(2.0g，14.6mmol，2.2當量)和碘甲烷(1.03g，7.28mmol，1.1當量)。在室溫，將混合物攪拌2小時。用飽和碳酸氫鈉溶液萃取反應混合物，并且用tbme萃取兩次。用水和10％氯化鋰溶液萃取有機層。合并有機層，經硫酸鈉干燥并濃縮至干以獲得作為淺黃色固體狀的所希望的2-氟-3-碘-6-甲基-5-硝基苯甲酸甲酯(2.32g，98％產率)，ms：m/e＝338.0(m+h
+
)。
[0306]
步驟3：3-氨基-6-氟-5-碘-2-甲基苯甲酸甲酯
[0307][0308]
將2-氟-3-碘-6-甲基-5-硝基苯甲酸(實例7，步驟2)(2.32g，6.85mmol)溶解在50ml的甲醇和25ml的水中。在室溫下，加入氯化銨(3.67g，68.5mmol，10當量)和鐵(3.06g，54.8mmol，8當量)。在70℃，將該混合物攪拌2小時。過濾反應混合物并蒸發至干。用飽和碳酸氫鈉溶液萃取殘余物，并且用乙酸乙酯萃取兩次。用水和鹽水萃取有機層。合并有機層，經硫酸鈉干燥并濃縮至干以獲得作為黃色油狀的所希望的3-氨基-6-氟-5-碘-2-甲基苯甲酸甲酯(2.22g，定量產率)，ms：m/e＝310.0(m+h
+
)。
[0309]
步驟4：2,5-二氟-3-碘-6-甲基-苯甲酸甲酯
[0310][0311]
將3-氨基-6-氟-5-碘-2-甲基苯甲酸甲酯(實例7，步驟3)(2.2g，7.21mmol)溶解在20ml的甲苯中。在室溫下，在冰冷卻下并且分批加入四氟硼酸亞硝鎓(1.26g，10.8mmol，1.5當量)。將混合物在室溫下攪拌10分鐘，再在110℃下攪拌10分鐘。將反應混合物倒在水上，并且用乙酸乙酯萃取兩次。有機層用鹽水萃取，以硫酸鈉干燥，并濃縮至干。通過快速層析在硅膠柱上純化粗產物，用庚烷:乙酸乙酯100:0至80:20的梯度洗脫，以獲得黃色油狀的所希望的產物(1.36g，43％產率)。
[0312]
步驟5：2-(溴甲基)-3,6-二氟-5-碘-苯甲酸甲酯
[0313]
[0314]
標題化合物作為無色固體獲得，ms:m/e＝409.0(m+h
+
)，使用與實例1步驟3所述類似的化學法，從2,5-二氟-3-碘-6-甲基-苯甲酸甲酯(實例7，步驟4)起始。
[0315]
步驟6：(2rs)-2-(4,7-二氟-6-碘-1-氧代-異吲哚啉-2-基)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯
[0316][0317]
標題化合物作為棕色油狀獲得，ms：m/e＝488.1(m+h
+
)，使用與實例2步驟1所述類似的化學法，從(2rs)-2-氨基-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯鹽酸鹽(實例1，步驟4)和2-(溴甲基)-3,6-二氟-5-碘-苯甲酸甲酯(實例7，步驟5)起始。
[0318]
步驟7：(2rs)-2-[4,7-二氟-6-[4-[3-[[4-(羥基甲基)-1-哌啶基]甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯
[0319][0320]
標題化合物作為白色泡沫固體獲得，ms：m/e＝631.5(m+h
+
)，使用與實例1步驟11所述類似的化學法，從(2rs)-2-(4,7-二氟-6-碘-1-氧代-異吲哚啉-2-基)-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯(實例7，步驟6)和[1-[[3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)苯基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]甲基]-4-哌啶基]甲醇(實例1，步驟10)起始。
[0321]
步驟8：(2rs)-2-[4,7-二氟-6-[4-[3-[[4-(羥基甲基)-1-哌啶基]甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)-n-噻唑-2-基-乙酰胺
[0322][0323]
標題化合物作為白色泡沫獲得，ms：m/e＝685.5(m+h
+
)，使用與實例1步驟12所述類似的化學法，從(2rs)-2-[4,7-二氟-6-[4-[3-[[4-(羥基甲基)-1-哌啶基]甲基]-1-雙環[1.1.1]戊烷基]苯基]-1-氧代-異吲哚啉-2-基]-2-(6,7-二氫-5h-吡咯并[1,2-c]咪唑-1-基)乙酸乙酯(實例7，步驟7)和噻唑-2-胺起始。